脂肪酸類 - 甘油三酯（TG）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) Triglyceride (TG) Content Assay kit 一、甘油三酯（TG）含量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品描述 甘油三酯（TG）是由長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不僅是細(xì)胞膜的主要成分，也是重要的
呼吸底物和供能物質(zhì)，在脂肪酸運(yùn)輸過(guò)程中具有重要作用。血清中內(nèi)源性三酰甘油主要以 VLDL 的
形式運(yùn)輸，外源性三酰甘油主要以 CM 的形式運(yùn)輸，甘油三酯含量的增高與動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾
病密切相關(guān)。
甘油三酯經(jīng) KOH 皂化水解生成甘油及脂肪酸，過(guò)碘酸氧化甘油生成甲醛，在銨離子存在下甲醛
能夠與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì)，產(chǎn)物在 420 nm 處具有特征吸收峰，通過(guò)吸光值的變化即可定量
檢測(cè)甘油三酯的含量。
二、甘油三酯（TG）含量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品內(nèi)容 
三、甘油三酯（TG）含量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品使用說(shuō)明 測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑：可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調(diào)式移液器、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴、正庚烷、異丙醇和蒸餾水。 甘油三酯（TG）的提?。筛鶕?jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例） ①細(xì)菌或細(xì)胞：離心收集細(xì)菌或細(xì)胞至離心管內(nèi)，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：試劑一體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 試劑一）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 20%或 200 W，超聲 2 s，間隔 1 s，總時(shí)間 1 min），4℃ 8000 g 離心 10 min，取上清待測(cè)。 ②組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g 組織，加
入 1 mL 試劑一）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 8000 g 離心 10 min，取上清待測(cè)。 ③血清（漿）、培養(yǎng)液等液體樣本：直接測(cè)定或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。 測(cè)定步驟
①分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 420 nm，蒸餾水調(diào)零。 ②在離心管中依次加入下列試劑：  注：加入試劑二后需劇烈震蕩，振蕩幅度、時(shí)間、反復(fù)次數(shù)以及等待分層時(shí)間均應(yīng)保持一致； 吸光值測(cè)定：取 200 μL 反應(yīng)液至微量玻璃比色皿或 96 孔板中，測(cè)定 420 nm 處吸光值，記為 A
測(cè)定，A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白；計(jì)算?A 測(cè)定=A 測(cè)定-A 空白，?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。注：空白管只需測(cè)
定 1-2 次。 3.甘油三酯（TG）含量計(jì)算 
四、甘油三酯（TG）含量檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng) ①為確保試驗(yàn)重復(fù)性，加入試劑二后需劇烈震蕩，振蕩幅度、時(shí)間、反復(fù)次數(shù)以及等待分層時(shí)間
均應(yīng)保持一致，檢測(cè)體系中 65℃水浴后冷卻時(shí)間應(yīng)保持一致； ②若測(cè)定吸光值超出標(biāo)準(zhǔn)吸光值線性范圍：高于最高值將樣品使用試劑一適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，
低于最低值建議適當(dāng)增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改； ③檢測(cè)過(guò)程中使用具有易揮發(fā)性物質(zhì)，建議在通風(fēng)櫥中進(jìn)行測(cè)定，并做好防護(hù)措施； ④為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失，測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)（以實(shí)際收到說(shuō)明書(shū)內(nèi)容為準(zhǔn)），
確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分，操作步驟是否清楚，且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定，
過(guò)程中問(wèn)題請(qǐng)您及時(shí)與工作人員聯(lián)系。
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