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生理生化檢測-超氧化物歧化酶(SOD)代測檢測服務(wù)

    超氧化物歧化酶(SOD)代測檢測服務(wù)

 超氧化物歧化酶(SOD)代測檢測服務(wù)

    測定原理

    超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在動、植物的體內(nèi),是一種清除超氧陰離子自由基的酶,它催化下面的反應(yīng):+o.-H2+HO

    反應(yīng)產(chǎn)物H2O2可由過氧化氫酶進一步分解或被過氧化物酶利用。超氧化物歧化酶抑制氮藍四唑(NBT)在光下的還原作用來確定酶活性的大小。在有氧化物質(zhì)存在下,核黃素可被光還原,被還原的核黃素在有氧條件下極易被氧化而產(chǎn)生超氧陰離子,超氧陰離子可將氮藍四唑還原為藍色的甲腙,后者在560nm處有最大吸收。而SOD可清除超氧陰離子,從而抑制了甲腙的形成。于是光還原反應(yīng)后,反應(yīng)液藍色愈深,說明酶的活性愈低,反之酶的活性俞高。據(jù)此可計算出酶活性的大小。

    測定方法:氮藍四唑法

    1.50mmol/lpH7.8的磷酸緩沖液(PBS)。含0.1mmol/lEDTA

    2.220mmol/l甲硫氨酸:稱3.2824g甲硫氨酸,用50mmol/lpH7.8的磷酸緩沖液定溶至100ml(現(xiàn)配現(xiàn)用)。

    3.1.25mmol/l氯化硝基四氮唑藍(NBT)溶液(現(xiàn)配):稱NBT0.102g,用

    50mmol/lpH7.8的磷酸緩沖液(PBS)溶解定容至100ml.

    4.0.033mmol/l核黃素:稱2.52mg用PBS溶解定容至200ml(遮光保存)


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